Extraction d’ADN des cellules eucaryotes

Étude de cas Sciences & technologies Biologie

Date de publication :

01/06/2009

Langue :

Français

Format :

.ppt

Nombre de pages :

28 diapos

Niveau :

grand public

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Sommaire :

Sommaire

Méthodes utilisant les solvants organiques
Méthodes utilisant les solvants non organiques
Méthodes utilisant les colonnes échangeuses d'ions

Résumé :

Extraire l'adn d'une cellule n'est pas évident car ce dernier est protégé par les parois et membranes de nature Lipoprotéiques et polysaccharidiques, qu'il faut dissoudre ou écarter pour pénétrer dans la cellule. Si la traversée du cytoplasme ne pose pas de problème, il faut ensuite pénétrer dans le noyau de la cellule. Mais l'adn n'est pas isolé. Il est entouré par des protéines qui doivent être éliminées. On appelle ce mécanisme la purification de l'adn. Enfin, au cours de l'extraction, la solution dans laquelle est plongé l'adn contient également toutes les substances qui ont servi à l'extraire. Il faut donc trouver une méthode pour séparer l'adn du milieu liquide(précipitation ou chromatographie). Ce n'est qu'au terme de cette étape que nous aurons isolé l'adn. En fonction de la nature et de la densité de la cellule, la procédure est plus ou moins complexe ou chère. L'extraction d'adn à partir de cellules procaryotes présente l'avantage de ne pas posséder d'enveloppe nucléaire : l'adn est donc facilement accessible. Le problème majeur consiste à obtenir une concentration suffisante de cellules (une culture stérile de plusieurs jours). Par contre, l'extraction d'adn à partir de cellules eucaryotes peut se faire en quelques heures.