La fécondation in vitro

TD Sciences & technologies Biologie

Date de publication :

22/01/2009

Langue :

Français

Format :

.doc

Nombre de pages :

6 pages

Niveau :

avancé

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Sommaire :

Sommaire

Matériel et méthodes
1. Préparation des gamètes mâles
2. Préparation des gamètes femelles
3. Mise en présence des gamètes
Résultats
Discussion

Résumé :

Au cours de ce TP, nous avons appréhendé les techniques de la fécondation in vitro. Pour cela, nous avons tout d'abord récupéré les gamètes mâles et femelles. Puis, nous les avons mis en présence, après divers traitements et nous avons observé ce qu'il se produisait. Certains ovocytes ont été fécondés, d'autres non. En général, chez la souris, le taux de réussite en fécondation in vitro (FIV) est d'environ 50 à 80% jusqu'au premier clivage, c'est-à-dire 24h après la fécondation. Nous discuterons donc des résultats obtenus lors de ce TP en comparaison avec ceux obtenus par les professionnels de la FIV. Enfin, nous envisagerons les diverses perspectives qu'ouvre cette technique de reproduction artificielle qu'est la FIV.

Préparation des gamètes mâles
Les souris mâles utilisées sont des reproducteurs confirmés (qui ont déjà prouvé leur fertilité) de 4 mois, mis au repos quelques jours avant. Pour récupérer le sperme, on a sacrifié les souris et on a prélevé la queue de l'épididyme et une partie du VAS déférent. Afin d'en extraire les spermatozoïdes, on a mis ce prélèvement dans un milieu de culture M16 modifié.
A la sortie de l'épididyme, les spermatozoïdes ne sont pas capacités : ils ne sont pas aptes à féconder l'ovocyte. Dans un cas de fécondation in vivo, la capacitation a lieu dans les voies génitales femelles. Aussi, pour cette expérience, il nous faut donc capaciter préalablement ces spermatozoïdes avant de les mettre en présence des ovocytes. Pour cela, nous avons réalisé la technique du swim-up.
Cette technique consiste à déposer les spermatozoïdes au fond d'un tube contenant un milieu capacitant (M16 modifié), dans des conditions favorables à la capacitation, c'est-à-dire en présence de CO2 (5%), à 37 C.