Méthodes d’étude du système immunitaire

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$Document biologie : Méthodes d’étude du système immunitaire$ biologie

exposé

publié le 07/05/2008

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Résumé

La production d'anticorps Nature de l’antigène: [molécules plus ou moins purifiées (protéines, peptides, polyoses...), cellules entières ou extraits cellulaires, antigène synthétique, haptène couplé à un porteur.…] Choix de l’animal: En fonction du type d'antigène : si l'on a un antigène de souris, on immunise une autre espèce comme un lapin. En fonction du type d'anticorps désiré : si on veut des anti-isotypes ou allotypes, l'immunisation se fera respectivement dans une autre espèce ou dans une espèceidentique. En fonction du type d'expérimentation à réaliser : par exemple pour la production d'anticorps monoclonaux, la formation d'hybrides est plus efficace avec le rat ou les souris BALB/c. Les autres paramètres sont la quantité d'immunsérum désiré, la facilité et le coût d'entretien de l'animal. Dans tous les cas, les animaux doivent être jeunes, adultes et en bonne santé. Comme la réponse immunitaire est influencée par des caractères génétiques, on immunise plusieurs animaux en même temps pour diminuer le bruit de fond.

Sommaire

Immunisation et production d'anticorps
Prélèvements
Eléments solubles : purification
Eléments solubles : tests qualitatifs et quantitatifs
1. Précipitation immunologique
2. Agglutination
3. Réactions utilisant le complément
4. Épreuves immuno-enzymatiques (ELISA, Western-blot)
5. Épreuves radio-immunologiques
6. Mesure des paramètres physico-chimiques de l'interaction Ag/Ab
Eléments solubles : tests fonctionnels
Etude des cellules de l'immunité
Cellules : tests qualitatifs et quantitatifs
1. Phénotypage
2. Isolement de clones cellulaires
3. Lymphoprolifération
4. Immunohistochimie
5. Hybridation in situ
6. Dilution limite
7. Tetramer staining
8. ELISPOT
Cellules : tests fonctionnels