Structure et fonction de la protéine ABCC11

La résistance aux médicaments (MDR) est l'un des obstacles majeurs à l'efficacité de la chimiothérapie. Le phénotype MDR est multifactoriel ; ces différents facteurs peuvent faire intervenir les transporteurs ABC (ATP-binding cassette). Dans ce projet, nous nous intéressons à la protéine abcc11. Nous étudions la relation structure/fonction, afin de cibler les acides aminés d'abcc11 pouvant intervenir dans la fixation des substrats. Nous avons aligné la séquence protéique d'abcc11 avec celle d'ABCC1 (membre de la même sous-famille). La phénylalanine 594 (Phe594) d'ABCC1 correspond à la leucine 429 (Leu429) d'abcc11 et Leu429 (abcc11) est localisé (TM6) face interne membranaire. La Phe594 joue un grand rôle dans le transport des substrats d'ABCC1, nous avons analysé l'importance de la Leu429 d'abcc11 sur son activité de transport. Pour cela, nous avons caractérisé le mutant Leu429Pro et le naturel. Les résultats ont montré que la lignée Flp abcc11 wt ne transporte pas Hoechst3342 et Rhodamine123. Puis nous avons étudié l'effet de la mutation sur la chimiorésistance vis-à-vis des médicaments tels que Daunorobicine, Gemcitadine, Fludarabine et 5FdURD.

La lignée Flp abcc11 wt présentait une grande résistance aux anticancéreux. En parallèle, nous avons tenté sans succès de changer par mutagenèse dirigée cette Leu429 en tryptophane, tyrosine ou phénylalanine. Ces premières données sont la base pour envisager une nouvelle approche pour étudier la relation structure/Activité de la protéine abcc11. En perspective nous essayerons d'étudier les autres acides aminés homologues de la protéine ABCC1 qui sont importants (Campbell, Koike et al. 2004) et d'évaluer leur intérêt dans l'activité de transport d'abcc11.